Diagnosi – PRRSControl

Qual è la probabilità di trovare un falso positivo nell’ELISA?

Gyula Balka — Mon, 09 Oct 2023 08:06:03 +0000

Se un allevamento risulta positivo alla PRRS mediante ELISA ma solo 1 campione su 15 risulta positivo, qual è la probabilità che si tratti di un falso positivo? La PRRS può essere trasmessa ad altri suini se li macelliamo e vendiamo la loro carne sul mercato? Dovremmo abbattere l’intero gregge se il vostro Paese è libero dalla PRRS?

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Che tipo di campioni o tessuti possiamo utilizzare per controllare lo stato della PRRS del mio allevamento mediante RT-qPCR?

HIPRA Swine Unit — Wed, 10 May 2023 08:27:54 +0000

La diagnosi di PRRS fornisce informazioni preziose per il processo decisionale in relazione al controllo e alla prevenzione della malattia. Di conseguenza, vengono proposti nuovi metodi di campionamento (emosieri da testicoli e lingue) per facilitare la raccolta dei campioni e aumentare il rilevamento del virus PRRS (vPRRS). L'obiettivo di questo studio era analizzare l'evoluzione dei risultati dell'analisi RT-qPCR e il tipo di campioni ricevuti presso Diagnos (HIPRA Diagnostic Laboratory [Spagna]) tra il 2018 e il 2021.

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Come utilizzare correttamente ELISA e PCR per il rilevamento e il monitoraggio della PRRS?

Enric Marco — Wed, 06 Apr 2022 07:55:44 +0000

La valutazione della sieroconversione di tutti gli animali in un allevamento è un metodo utilizzato oggi negli allevamenti moltiplicatori e commerciali in Spagna/Europa? Se sì, in quale percentuale di queste titolazioni vengono utilizzati PCR ed ELISA? Il gold standard è sempre utilizzato o sono disponibili altre possibilità commerciali? A che età devono essere prelevati i campioni e con quale frequenza va mantenuta questa pratica per avere un’idea chiara di cosa sta succedendo nell’allevamento? La sieroconversione valutata tramite test ELISA non è il metodo migliore per verificare se un allevamento ha uno stato immunitario omogeneo che impedisce il ricircolo interno del virus PRRS. Dopo un’infezione, non tutti gli animali sviluppano una risposta immunitaria, che, a seconda dei casi, dà un risultato ELISA positivo, e potrebbe esserci sempre una percentuale di animali che non rispondono e rimangono negativi, senza che ciò significhi che non sono stati infettati. D’altronde anche la durata degli anticorpi rilevabili con il test ELISA ha un’elevata variabilità individuale, senza che vi sia una correlazione con la durata della protezione reale, può aumentare anche la percentuale di negatività quando si effettua in una popolazione un test sierologico di controllo. In generale, il test ELISA è usato per […]

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Cosa possiamo fare quando si sospetta un “falso positivo” in un test sierologico?

Enric Marco — Tue, 08 Feb 2022 10:43:15 +0000

In un sito 1-2 da 200 scrofe, sono stati prelevati 20 campioni di sangue da scrofe, scrofette e suinetti. Tutti i campioni sono risultati negativi per PRRS mediante ELISA tranne uno, che proveniva da una scrofa di 5° parto. Non sono stati osservati segni clinici associati alla PRRS e non è stata effettuata alcuna vaccinazione contro questa malattia. L’allevamento ha buone performance, 90% di fertilità e 14 suinetti svezzati per scrofa. Come interpretare questi risultati sierologici? Nessun test ELISA è specifico al 100%. La specificità è la probabilità del test di rilevare correttamente gli animali negativi. Quando ci si riferisce specificatamente al virus PRRS, i migliori test ELISA sul mercato sono in grado di rilevare correttamente il 94-99% di animali negativi, ma c’è sempre una piccola percentuale che può dare una reazione ELISA positiva senza essere stati effettivamente infettati dal virus : questi sono noti come falsi positivi. Le cause possono essere molteplici e, in molti casi, è legato alla presenza di proteine nel sangue dell’animale rilevate dal test che possono essere identificate come anticorpi contro la PRRS. Se l’allevamento non ha avuto segni clinici indicativi della malattia, il positivo è molto probabilmente un “falso positivo“. Il modo per […]

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Come devono essere eseguiti quarantena, acclimatamento e monitoraggio delle scrofette da rimonta negli allevamenti positivi alla PRRS?

Enric Marco — Wed, 13 Oct 2021 13:39:56 +0000

Durata della quarantena Quando si desidera introdurre animali da rimonta negativi in un allevamento positivo alla PRRS, la quarantena, o piuttosto l’acclimatamento, devono essere lunghi. Per “lungo” si intende un periodo non inferiore a 2 mesi poiché, in questo tempo, il nostro intento consiste nell’infettare i nuovi arrivi, dar loro il tempo di riprendersi dall’infezione e perdere lo stato di diffusori del virus prima di introdurli nell’allevamento e cominciare a lavorarci. Lo status delle scrofette rispetto alla PRRS quando vengono introdotte nell’allevamento da riproduzione L’obiettivo è quello di far acquisire alle scrofette da introdurre l’immunità alla PRRS, e diventare quindi positive al test ELISA, ma senza diffondere il virus, vale a dire, diventando negative alla PCR. Come si esegue l’acclimatamento? Esistono molte tecniche per raggiungere questo status, sebbene alcune funzionino meglio di altre, soprattutto in relazione al rischio di produrre la malattia. 1. Esposizione virale con animali che diffonfondono il virus Il metodo più comune consiste nel mettere le scrofette in contatto con animali dell’allevamento che sappiamo per certo diffondono il virus. Questo contatto deve durare circa 15 giorni e garantire un contatto diretto tra gli animali diffusori e le scrofette. 2. Inoculazione del virus vivo: Un altro metodo di […]

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È previsto che scrofe vaccinate con un vaccino vivo modificato (MLV) contro la PRRS siano tutte positive al test ELISA?

Enric Mateu — Wed, 17 Mar 2021 13:39:47 +0000

La risposta alla domanda cambia a seconda che ci si riferisca a scrofe naïve vaccinate contro la PRRS per la prima volta o ad animali che hanno ricevuto più vaccinazioni con un vaccino vivo modificato contro la PRRS. Scrofe naïve vaccinate con vaccino vivo modificato contro la PRRS per la prima volta Quando scrofe naïve vengono vaccinate per la prima volta (vaccino vivo modificato contro la PRRS) circa la metà di esse presenterà sieroconversione tra 7 e 10 giorni dopo la vaccinazione ed entro il giorno 21 dalla vaccinazione tutte le scrofe svilupperanno gli anticorpi contro il PRRSV. I valori ELISA (densità ottiche o rapporti S/P) possono variare in misura significativa tra gli animali. Per contro, quando le scrofe sono vaccinate più volte con vaccini contro la PRRS, una proporzione variabile di esse può essere negativa al test ELISA. Sieroconversione di scrofe multivaccinate Inoltre, in molti animali già sieropositivi, una nuova somministrazione di un vaccino contro la PRRS non produce una chiara sieroconversione in ELISA. Va notato che, utilizzando kit ELISA diversi, i singoli animali che risultano negativi possono essere diversi. In altre parole, il test ELISA utilizzato influenza il risultato. Secondo la nostra esperienza, quando gli animali vengono esaminati […]

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Se ci limitiamo a rilevare gli anticorpi suini contro il PRRSV, possiamo sapere se il suino è stato infettato dal virus di campo?

Enric Marco — Tue, 19 Sep 2017 13:39:32 +0000

Il rilevamento degli anticorpi della PRRS in un suino indica che il suino è stato in contatto con il virus. Sappiamo che i suini infetti possono rimanere portatori del virus della PRRS per un po’ di tempo (fino a diversi mesi in alcuni casi). La durata di questo stato di portatore varia a seconda dell’animale; alcuni eliminano il virus in 4 settimane e altri hanno bisogno di più tempo. Possiamo dire pertanto che un animale positivo alla PRRS con il test ELISA può anche essere portatore del virus, ma non in tutti i casi. La durata dei titoli ELISA nei suini infetti può variare in base a diversi fattori: tipo di test utilizzato, ma anche l’animale stesso. Un animale infettato di recente può essere portatore del virus, ma essere ancora negativo all’ELISA, ma anche alcuni animali possono diventare negativi all’ELISA abbastanza rapidamente ed essere ancora portatori del virus. Di conseguenza, il solo test ELISA non è sufficiente per sapere se il suino è portatore del virus della PRRS. È necessario combinare questo tipo di test con altri test di rilevamento dell’antigene della PRRS come la PCR per sapere se gli animali sono portatori del virus. Ma anche effetuando questi 2 test […]

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Quanti animali dovrebbero essere campionati per ottenere risultati affidabili circa la presenza del PRRSV in una mandria di 1200 scrofe?

Lars Erik Larsen — Fri, 01 Sep 2017 13:39:30 +0000

La strategia di campionamento dipende molto dallo scopo del test, dallo stato della mandria e anche dal tipo di analisi da eseguire, e naturalmente anche dalla sensibilità del test applicato. Nelle mandrie più grandi è importante testare tutte le sezioni o le cosiddette unità epidemiologiche (cioè gruppi e fasce di età che vengono tenuti separati). Il numero di campioni per gruppo dipende, nuovamente, dallo scopo e dallo stato della mandria o – alla fine dei conti – dalla prevalenza attesa e dal livello di confidenza richiesto (normalmente è richiesto il 95 o il 99%). Per confermare la negatività di una mandria/gruppo/unità epidemiologica (cioè di un allevamento libero da PRRSV): Nel sistema SPF danese, in una popolazione di 1000 animali, vengono prelevati e testati in ELISA per la presenza di anticorpi 20 campioni di siero; questo sistema è in grado di identificare almeno 1 animale positivo (con un livello di confidenza del 95%) se la prevalenza è superiore a circa il 15 %. Per trovare animali positivi al virus in una popolazione positiva al PRRSV (cioè dove tutti o un sottoinsieme di animali hanno anticorpi): è necessario eseguire la PCR su siero o fluidi orali (di nuovo, 20 campioni se la […]

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I risultati del test ELISA per la PRRS possono essere diversi per i campioni di siero o di fluidi orali?

Enric Marco — Fri, 25 Aug 2017 13:39:29 +0000

I risultati ottenuti analizzando campioni di siero o di fluidi orali con un test ELISA devono essere simili, a condizione che il tipo di test usato sia lo stesso e che i campioni provengano dallo stesso animale. Se non viene utilizzato lo stesso tipo di test (produttori diversi) potrebbero esserci delle differenze, ma non perché il tipo di campione sia diverso, in quanto lo stesso potrebbe succedere se entrambi i campioni fossero siero. Le proteine rilevate dai diversi test ELISA disponibili in commercio non sono sempre le stesse. Questo influenza la durata della positività rilevata che può variare tra i diversi test ELISA. In ogni caso, usando lo stesso tipo di test, potrebbe succedere che i campioni di fluidi orali diano risultati negativi più velocemente dei campioni di siero (i fluidi orali sono un campione più sporco rispetto al siero e gli enzimi che contiene potrebbero influenzare le proteine). Gli anticorpi della PRRS presenti nella saliva provengono dal sangue, per cui, se l’esito è invertito (risultati positivi nei fluidi orali e negativi nel siero), occorre prelevare nuovamente il campione in quanto non ha molto senso biologico. Fai anche tu una domanda! Vai su pig333.com e invia la tua domanda ai […]

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In caso di una ricircolazione della PRRS in un allevamento positivo, gli animali interessati possono sempre sieroconvertire? In che misura e per quanto tempo?

Enric Mateu — Thu, 02 Jun 2016 13:39:26 +0000

È molto difficile rispondere a questa domanda senza ulteriori dati. In linea di principio, la riemergenza clinica dello stesso isolato di PRRSV in un allevamento si produce di solito perché ci sono sottopopolazioni di suini senza un’adeguata immunità (o perfino suini naïve). Di conseguenza, vengono osservati segni clinici in animali senza precedente immunità attiva. In tal caso, la sieroconversione si verifica in poco tempo (7-14 giorni) dopo l’insorgenza dell’infezione. Altra questione è l’introduzione di un nuovo ceppo di PRRSV in una mandria già infettata/vaccinata. Quando ciò avviene, il risultato di questa nuova introduzione può variare da quasi nulla a malattia clinica grave, a seconda della virulenza del nuovo ceppo e della protezione offerta dall’immunità preesistente. In tali circostanze, ossia l’introduzione di un nuovo isolato virulento, gli animali non devono necessariamente mostrare sieroconversione in ELISA. Di fatto, quando abbiamo eseguito esperimenti di esposizione a virus eterologo in suini con immunità preesistente, non è stata sempre osservata sieroconversione. Ciò sembra avere una componente idiosincratica, ma è anche correlato agli isolati virali coinvolti. Se si teme di essere in presenza di un focolaio epidemico in un allevamento vaccinato/immune, concentrarsi sugli animali malati e sui nuovi nati, utilizzare la PCR per il rilevamento del […]

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