The sampling strategy very much depend on the purpose of the test, the status of the herd and also what kind of analysis to be performed and of course also on the sensitivity of the applied test.
In larger herds it’s important to test all sections or so-called epidemiological units (i.e. batches and age groups that are kept separated).
The number of samples per section again depend on the purpose and the status of the herd or – by the end of the day – the expected prevalence and the required confident level (95 or 99 % is normally required).
To confirm negative status in a herd/section/epidemiological unit (i.e. in a PRRSV free herd):
In the Danish SPF system, 20 serum samples are taken and tested for antibodies by ELISA – in a population of 1000 animals this will identify minimum 1 positive animal (95% confidence level) if the prevalence is above approximately 15 % which will be the case if a naïve herd is infected.
To find virus positive animals in a PRRSV positive population (i.e. where all or a subset of animals have antibodies):
You need to perform PCR on serum or oral fluid – again 20 samples if the prevalence is above 15 % – if you want to find one positive animal in a population of 1000 animals and you expect that the prevalence of virus positive animals is very low (i.e. 1 %) you need more than 250 samples.
In the case of an acute outbreak serology cannot be used in the first phase – it takes 7-10 days before the pigs seroconvert. PCR would detect it earlier (2-3 days after infection – and up to 3-4 weeks in serum with standard real time PCR assays).
You can ask your own question! Visit Pig333.com and submit your question to our experts.
От скольких животных необходимо отобрать пробы для получения достоверных результатов о наличии возбудителя РРСС в стаде c 1200 свиноматками.
Стратегия отбора образцов очень сильно зависит от цели исследования, статуса поголовья, того какой анализ должен быть сделан и, конечно же, от чувствительности используемых тестов.
На фермах с большим поголовьем важно проводить анализы всех секций или так называемых эпидемиологических единиц (н-р, партий и возрастных групп, которые содержатся раздельно).
Количество образцов в секции, опять же, зависит от цели анализа и от статуса поголовья или – в конечном итоге – от ожидаемого распространения и требуемого уровня достоверности (обычно требуется 95 или 99%).
Для подтверждения отрицательного статуса поголовья/секции/эпидемиологической единицы (имеется в виду, в свободном от вируса РРСС поголовье):
В рамках датской системы СПФ, отбирают и тестируют на антитела методом ИФА 20 серологических образцов, при этом, если превалентность превышает уровень в приблизительно 15% (а так оно и будет, если наивное поголовье заражено) в стаде численностью 1000 голов будет выявлено минимум 1 положительное животное (95% уровень достоверности).
Для определения положительных на вирус РРСС животных в положительном на него поголовье (т.е, в таком, где у всех животных поголовно или у части из них имеются антитела):
Необходимо провести ПЦР-анализ серологической жидкости или слюны – снова 20 образцов, если зараженность превышает 15%. Если же вы хотите обнаружить одно положительное животное в стаде на 1000 голов, ожидая при этом, что доля вирус-положительных животных в нем очень невелика (т.е., 1%), вам нужно более 250 образцов.
При острой вспышке, в первую ее фазу, серологический анализ использовать нельзя – на то, чтобы свиньи сероконвертировали, уйдет 7-10 дней. Более раннее ее обнаружение позволяет сделать ПЦР (стандартные ПЦР-исследования сыворотки крови – со 2-3 дня после заражения до 3-4 недели.
National Veterinary Institute of Denmark